固相萃取仪 ASE-12
固相萃取仪 ASE-12 技术详解
安捷伦1200系列高效液相色谱系统是分析实验室中广泛使用的精密仪器,其中自动馏分收集器(G1364C)和馏分收集器恒温装置(1330B)作为纯化系统的关键组件,在药物开发、代谢物研究和生物分子分离等领域发挥着重要作用。本文将详细介绍这两款设备的性能特点、技术参数、应用场景以及系统优势,为实验室工作者提供全面的参考信息。
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安捷伦1200系列高效液相色谱系统是分析实验室中广泛使用的精密仪器,其中自动馏分收集器(G1364C)和馏分收集器恒温装置(1330B)作为纯化系统的关键组件,在药物开发、代谢物研究和生物分子分离等领域发挥着重要作用。本文将详细介绍这两款设备的性能特点、技术参数、应用场景以及系统优势,为实验室工作者提供全面的参考信息。
安捷伦1200系列自动馏分收集器G1364C是一款高精度、高性能的馏分收集设备,专为分析级纯化工作流程设计。该设备采用模块化设计,可与安捷伦1200系列液相色谱系统的其他组件无缝集成,实现从分析到半制备规模的高效馏分收集。G1364C的最大流速可达5 mL/min,能够满足大多数常规纯化应用的需求,同时保证收集过程的精确性和可靠性。
馏分收集器G1364C具备多种触发模式,包括时间收集、峰收集和质量收集,用户可根据实验需求灵活选择。基于时间的收集模式适用于已知保留时间的化合物,能够在指定时间窗口内自动收集馏分,不受检测器灵敏度影响,这种方法能最大程度减少由低浓度化合物引起的样品损失。基于峰的收集模式则根据检测器信号触发,适用于分离丰度最高的目标化合物,通过设定阈值实现自动收集。此外,G1364C还配备了先进的延迟传感器,能够自动计算并校正峰检测与收集之间的时间差,这对于微量组分的准确收集尤为关键。
在硬件配置方面,G1364C标准配置包含40位2mL样品盘和15位6mL样品盘,满足不同体积馏分的收集需求。设备采用精确的机械传动系统,确保收集位置的准确性,同时具备防交叉污染设计,避免不同馏分之间的混合。收集阀门的快速响应特性保证了即使对于窄峰也能实现准确收集,最小收集时间间隔可达数秒钟,大大提高了分离分辨率。G1364C还支持与安捷伦OpenLab CDS ChemStation等控制软件无缝连接,实现全自动化的方法控制和数据记录,符合GLP/GMP规范要求。
馏分收集器恒温装置1330B是专为G1364C等馏分收集器设计的温度控制模块,能够精确调节馏分收集区域的温度环境。该装置通过与主收集器的集成,为热不稳定化合物或需要低温操作的分离纯化过程提供了关键的温度控制解决方案。1330B的温控范围通常覆盖4°C至40°C(1°C步进),满足大多数生物分子和药物化合物对温度稳定性的要求。
恒温装置1330B采用高效的热交换设计和精确的PID温度控制算法,能够快速达到设定温度并保持出色的温度稳定性,控温精度可达±0.5°C。这种高精度的温度控制对于保证馏分中目标化合物的稳定性至关重要,特别是对于蛋白质、酶、核酸等生物大分子的纯化,低温环境能够有效抑制降解酶的活性,防止目标分子降解。同时,恒温控制也减少了因温度波动引起的收集体积误差,提高了实验的重复性和可靠性。
1330B的设计充分考虑了用户友好性和系统集成性。模块可直接安装在G1364C馏分收集器上,形成紧凑的整体系统,不占用额外空间。温控区域覆盖样品盘位置,确保收集到的每个馏分都能立即处于设定的温度环境中。装置还配备了温度监控和安全报警功能,当温度超出设定范围或系统出现异常时,会自动发出警报并采取保护措施,防止样品损失。
G1364C馏分收集器与1330B恒温装置的组合在药物代谢物研究和生物分子纯化领域表现出色。一个典型应用案例是药物代谢物的纯化和鉴定工作流程:首先使用分析型液相色谱柱(如ZORBAX SB-C18,4.6×75mm)对肝微粒体温育样品进行分析,通过UV和质谱检测器(如Agilent 6540 Q-TOF)识别目标代谢物;然后利用安捷伦自动纯化软件将分析方法放大至半制备柱(如ZORBAX SB-C18,9.4×50mm);最后通过G1364C馏分收集器在1330B恒温装置控制的低温环境下收集目标代谢物馏分。
在基于质谱触发的高灵敏度馏分收集中,G1364C展现出独特优势。当与单四极杆液质联用系统(如Agilent 6150)配合使用时,可在单离子监测(SIM)模式下实现高灵敏度检测,并通过质量触发模式精确收集痕量代谢物。例如,在安非他酮代谢物研究中,系统成功分离并收集了羟基安非他酮(m/z 256)和赤苏安非他酮(m/z 242)等代谢物,为后续的核磁共振分析和毒理学研究提供了高纯度样品。
对于生物大分子的纯化,如蛋白质和肽段的制备,1330B恒温装置的低温控制功能显得尤为重要。在4°C环境下进行馏分收集,能够有效保持目标蛋白的天然构象和生物活性,防止聚集或降解。同时,G1364C的大容量样品盘支持长时间连续收集,适合从大型制备柱中分离毫克级甚至克级样品,满足下游分析或应用的需求。
G1364C与1330B的组合提供了安捷伦1200纯化平台的几项核心技术优势。首先是精确的馏分触发能力,系统能够根据UV、MS或其它检测器信号,通过实时数据处理和高精度触发控制,确保收集时机的准确性。延迟体积的自动计算和校正功能消除了系统死体积对收集时间的影响,特别是对于微量组分的回收至关重要。
其次,该系统的灵活性和可扩展性值得称道。G1364C支持多种收集模式(时间、峰、质量)的组合使用,在同一方法中可根据不同馏分的特性采用最适合的收集策略。系统还可与安捷伦的制备泵(如G1361A)、大体积自动进样器(如G2260A)和制备型检测器流通池组成完整的制备纯化系统,实现从分析规模到制备规模的无缝放大。
在数据完整性和合规性方面,系统符合严格的法规要求,具备完整的审计追踪功能,所有收集事件都与色谱数据关联记录,满足制药行业对方法可追溯性的要求。通过安捷伦OpenLAB CDS等控制软件,用户可以实现从方法开发、优化到大规模纯化的全流程控制,大大提高了工作效率和结果可靠性。
为保证G1364C馏分收集器和1330B恒温装置的最佳性能和长期可靠性,适当的维护保养至关重要。对于馏分收集器,应定期检查收集针和阀门的密封性,防止泄漏或交叉污染;样品盘轨道和传动机构需要保持清洁,避免碎屑积累影响定位精度;收集管线(标准配置为0.25mm ID)应根据使用频率定期更换,防止堵塞或吸附造成的回收率下降。
对于1330B恒温装置,关键维护点包括定期检查制冷系统的冷却液水平(如适用),确保散热口畅通无阻;温度传感器的校准应按照厂家建议的间隔进行,保证控温精度;冷凝水排放系统(在低温运行时产生)需要保持通畅,防止积水影响设备性能或造成电气隐患。
在日常使用中,操作人员应注意避免超过系统的最大流速限制(G1364C为5 mL/min),高压应用时应选择合适内径的管线(制备级应用推荐0.5mm ID管线)。当处理腐蚀性或高盐度流动相时,收集完成后应立即用兼容溶剂冲洗系统,防止盐结晶或腐蚀性物质对管路和阀门的损害。
表:G1364C与1330B主要技术参数对比
参数 | G1364C馏分收集器 | 1330B恒温装置 |
---|---|---|
最大流速 | 5 mL/min | - |
温度控制范围 | - | 4°C至40°C(1°C步进) |
收集模式 | 时间、峰、质量触发 | - |
样品盘配置 | 40位2mL和15位6mL标准配置 | 兼容标准样品盘 |
控制方式 | 通过HPLC软件集成控制 | 集成于馏分收集器控制系统 |
典型应用 | 分析至半制备规模纯化 | 热敏感样品收集 |