液相色谱仪（HPLC）作为实验室核心分析设备，其运行稳定性直接影响实验结果。仪器故障往往表现为压力异常、基线漂移、峰形畸变等问题。本文基于色谱系统模块化特点，分类解析常见故障的成因与处理方法，并提供预防性维护策略。

一、压力异常类故障

（1）压力过高（>400 Bar）

成因排查‌：

色谱柱堵塞（柱压突增200 Bar以上）

在线过滤器或保护柱污染（压力梯度上升）

混合器比例阀结晶（乙腈-缓冲盐体系易发）

解决方案‌：

反向冲洗色谱柱（流速0.2 mL/min，逐步提高至1 mL/min）

更换在线过滤器滤芯（建议每2000针更换）

清洗比例阀：先用超纯水冲洗30分钟，再用20%硝酸超声处理

（2）压力波动（±50 Bar）

关键诱因‌：

单向阀球面污染（发生频率占比62%）

柱塞杆密封圈磨损（压力波动伴随液滴渗漏）

脱气机效率下降（气泡导致泵头空转）

处理流程‌：

拆解单向阀，异丙醇超声清洗15分钟

更换柱塞杆密封圈（推荐每1500小时强制更换）

检查脱气机膜管完整性，氦气脱气流量设为3 mL/min

二、色谱峰异常问题

（1）峰分叉/拖尾

诊断要点‌：

色谱柱柱效下降（理论塔板数<2000）

进样针残留污染（连续进样RSD>5%）

流动相pH值偏移（缓冲盐析出）

优化措施‌：

柱再生：依次用20倍柱体积的甲醇-水（95:5）、0.1% TFA冲洗

进样针清洗：6 mol/L NaOH与1% HF交替冲洗

调节流动相pH至填料耐受范围（如C18柱适用pH 2-8）

（2）保留时间漂移

根本原因‌：

柱温箱控温偏差（±2℃可导致保留时间变化5%）

梯度延迟体积不匹配（初始保留时间偏移>0.5 min）

流动相组成变化（乙腈挥发致有机相比例降低）

校正方法‌：

校准柱温箱：使用NIST标准温度计验证

测定系统梯度延迟体积，软件参数补偿

流动相现配现用，密封储存（有机相每日补加5%）

三、基线噪声与漂移

（1）高频噪声（>10 Hz）

故障源定位‌：

检测器氘灯老化（能量值<800）

流通池气泡干扰（基线毛刺呈周期性）

电源接地不良（噪声幅值>2 mAU）

处置方案‌：

更换氘灯（建议使用寿命2000小时）

启动在线脱气，流速1 mL/min冲洗30分钟

检测接地电阻（需<4 Ω），加装独立地线

（2）基线漂移（斜率>0.1 mAU/min）

诱因分析‌：

柱温未平衡（每升高1℃引起漂移0.05 mAU）

流动相组成变化（乙腈吸热导致温度梯度）

检测池污染（蛋白质/脂类吸附）

稳定化操作‌：

开机预热1小时，柱温波动控制在±0.5℃

使用柱前预热器，温差设定位3℃

依次用0.1 mol/L NaOH、异丙醇冲洗检测池

四、漏液与系统污染

（1）泵头渗漏

高发部位‌：

柱塞杆密封圈（渗漏率占比75%）

混合器接头（盐结晶导致密封失效）

处理规范‌：

更换密封圈时涂抹硅脂（厚度<0.1 mm）

使用扭矩扳手紧固接头（6-8 N·m）

（2）交叉污染

污染途径‌：

自动进样器残留（针座与定量环）

色谱柱记忆效应（强保留组分累积）

净化程序‌：

执行强溶剂冲洗程序（甲醇-水-0.1%甲酸交替）

色谱柱再生：10%醋酸冲洗后保存于纯乙腈

五、预防性维护体系

分级维护计划‌

每日：检查压力波动、氘灯能量值

每周：冲洗进样针、测试柱效

每月：更换在线过滤片、校验流速

智能监控系统‌

集成压力传感器、温度记录模块，通过LIMS系统实时预警。当柱压超过设定阈值（如300 Bar）时自动触发冲洗程序。

耗材生命周期管理‌

建立密封圈、氘灯、滤芯等耗材的更换数据库，设置提前量预警（如剩余寿命10%时提示）。

液相色谱仪的稳定运行需依托系统化故障诊断能力与预防性维护策略。实验室应建立包含故障代码库、维修视频库的知识管理系统，通过定期培训提升技术人员对压力动力学、化学相容性等核心原理的理解。未来随着AI诊断技术的发展，色谱系统有望实现90%以上常规故障的自动识别与修复。