高效液相色谱仪（HPLC）是制药、化工、食品检测等领域广泛使用的精密分析仪器。为确保检测结果的准确性和仪器使用寿命，操作人员需严格遵守以下操作规范及注意事项。

操作前准备

1.流动相处理：

-使用色谱纯试剂，水相需新鲜制备并过滤（0.45μm滤膜）

-有机相需超声脱气15-20分钟

2.色谱柱检查：

-确认色谱柱型号与分析方法匹配

-检查柱压是否在正常范围内

3.系统冲洗：

-新柱使用前按说明书进行活化平衡

-更换流动相时需梯度过渡，避免盐析

操作流程

1.开机顺序：

电源→在线脱气机→泵→柱温箱→检测器

2.参数设置：

-流速应逐步提升至分析方法要求

-柱温偏差不超过±2℃

3.进样注意：

-样品需经0.22μm滤膜过滤

-进样体积不超过定量环容积的80%

维护保养要点

1.每日维护：

-实验后用适当溶剂冲洗系统（含盐流动相需先用水冲洗）

-记录基线噪声和漂移值

2.长期保存：

-色谱柱应保存在指定溶剂中

-系统需用10%甲醇水溶液封存

3.故障预警：

-压力异常波动超过±10%应立即排查

-出现鬼峰需检查密封圈和溶剂纯度

四、安全注意事项

-高压管路连接处禁止在带压状态下拆卸

-废液需分类收集，有机废液不得直接排放

-紫外检测器灯源关闭后需冷却30分钟再关机

规范操作可延长HPLC使用寿命3-5年，建议每季度进行系统适用性测试，每年由专业工程师进行全面校验。操作人员应建立完整的仪器使用记录，包括色谱柱使用次数、压力变化趋势等关键数据。

注：本文操作规范参照《中国药典》2020年版通则相关要求编制，具体参数需根据各型号仪器说明书调整。